Eventos em Ciências Florestais, VIII Simpósio de Pós-Graduação em Ciências Florestais

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Análise comparativa do uso dos primers oligo (dT) e random na síntese de cDNA a partir de amostras de mRNA
Viviane Ferreira Anjos, Ariadne Marques, Inaê Mariê Araújo Silva, Any Caroliny Pinto Rodrigues, Janaína Fernandes Gonçalves, Marcelo Luiz Laia

Última alteração: 2014-10-17

Resumo


A análise da expressão gênica é de grande importância para os estudos dos processos fisiológicos e metabólicos de indivíduos sob condições de estresse. Nesse processo a obtenção de DNA complementar (cDNA) a molecular de RNA mensageiro (mRNA) mediante a atividade transferase terminal da enzima transcriptase reversa (RT) é uma peça fundamental. No entanto as características do cDNA podem sofrer alterações dependendo da maneira como a reação de transcrição é preparada. Nesse sentido, o presente estudo buscou verificar qual dos dois primers mais utilizados no processo de transcrição, Oligo (dT) ou Random fornecem melhores resultado. Para tanto foram realizados dois processo de transcrição a partir de duas amostras contraste de RNA total, tratadas com a enzima DNase I e purificadas com fenol pH ácido, utilizando cada um dos primers. Análise por eletroforese em gel de agarose para as duas amostras após a síntese do cDNA possibilitaram a visualização de rastros e bandas indicando o sucesso do processo. Os resultados demostraram que ambos os primers, dentro de suas especificidades, foram eficientes no processo de síntese do cDNA fita dupla. Permitindo inferir que a escolha do primer dependerá das especificidades do processo no qual o cDNA obtido será subsequentemente utilizado.


Palavras-chave


biotecnologia; expressão gênica; estresse; transcriptase reversa.

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